Kryssprøver: hva er de for, teknikk og fundament, faser

Tverrprøver er en serie laboratorieundersøkelser som utføres for å avgjøre om blodproduktene fra en donor (hovedsakelig helblod og globulært konsentrat) er kompatible med mottakerens blod.

Det er en komplementær test i tillegg til ABO-kompatibiliteten og Rh-faktoren. Årsaken til kryssprøving er at noen ganger kan to personer (donor-mottaker) ha samme ABO- og Rh-gruppe, men deres blod er fortsatt uforenlig.

Slike inkompatibilitet skyldes tilstedeværelsen av antistoffer mot en rekke røde blodcelleproteiner kjent som mindre antigener. Disse antigenene blir ikke rutinemessig vurdert som gjøres med blodgruppe (ABO) og Rh-faktor.

Dette skyldes at de mindre antigenene er mye mindre hyppige og har et variabelt uttrykk i hver enkelt person, derfor er det praktisk talt umulig å gruppere dem i kategorier som gjøres med gruppen og Rh-faktoren.

I stedet blir donorrøde blodlegemer blandet med pasientens serum (større kompatibilitetstest) og pasientens røde blodlegemer med donorserum (mindre kompatibilitetstest) for å oppdage tilstedeværelse av antigen-antistoffreaksjoner.

Når det er antistoffer mot mindre antigener, enten i pasientens eller giverens serum, er testen sagt å være positiv, så i de fleste tilfeller kan ikke denne spesifikke enheten av blodet transfiseres.

ABO Group

For å forstå godt at kryssreaksjoner behandles først, er det nødvendig å kjenne grunnleggende om blodgrupper.

I denne forstand er det viktigste å vite at blod kan klassifiseres i fire grupper: A, B, AB og O.

Hver av disse gruppene uttrykker på overflaten av de røde blodcellene et bestemt protein (antigen), som er identifisert som et fremmedlegeme av antistoffene til en potensiell reseptor av en annen gruppe.

Den mest slående av antigen-antistoffreaksjonene i blodkompatibilitet er at ingen tidligere eksponering for antigenet er nødvendig for antistoffer å eksistere. Dette er kjent som naturlige antistoffer.

Naturlige antistoffer

Generelt, for at antistoffer skal eksistere i en persons kropp, er det nødvendig at hvite blodlegemer tidligere har vært utsatt for antigenet.

Dette betyr at ved første kontakt mellom det fremmede antigenet og organismen er det ingen antistoffer, siden disse genereres senere, etter den første kontakten. Derfor er det umulig for immunsystemet å ha antistoffer mot for eksempel et bestemt virus, hvis det ikke har vært utsatt for det tidligere.

Det eneste unntaket til ovennevnte er anti AB antigenene. I disse tilfellene har personen antistoffer mot antigenet at deres røde blodlegemer ikke har, selv om de aldri har vært i kontakt med en annen persons røde blodlegemer. Dette er kjent som naturlige antistoffer.

Antigener og antistoffer relatert til blodgruppen

Blodgruppene bestemmes i tilfelle av ABO-systemet ved tilstedeværelse av spesifikke antigener (A eller B) i membranet av de røde blodlegemer og i motsetning til antistoffer mot antigenet som er fraværende i erytrocytmembranen.

Således uttrykker en person med blodgruppe A antigen A på overflaten av deres røde blodlegemer, mens det i serum er anti-B-antistoffer.

Tvert imot, hos pasienter i gruppe B, er antigen B funnet, mens antistoffer er anti-A.

Nå har pasienter med AB-blod både A- og B-antigener. Derfor er det ingen antistoffer, da det ville ødelegge personens røde blodlegemer.

Det motsatte skjer i gruppe O, hvor erytrocytmembranen ikke presenterer noen av de to antigenene (verken A eller B), mens i serum er det anti-A og anti-B-antistoffer.

ABO-gruppens inkompatibilitet

Fra ovenstående kan kompatibiliteten til ABO-blodgruppene lett utledes, da antigenet av erytrocytmembranet er automatisk kjent antistoffer i serumet. dermed:

- Blod A er kompatibel med gruppe A og gruppe O.

- Blodgruppe B er kompatibel med blod B og O.

- Folk med gruppe O kan bare motta blod O (siden de har anti-A og anti-B-antistoffer), selv om blodet deres mottas av alle andre grupper uten problemer siden det mangler antigener.

- Til slutt. De som har blodgruppe AB kan få blod fra alle andre grupper (A, B, O og selvfølgelig AB), siden de ikke har antistoffer mot noen av antigenene. Imidlertid kan bare AB-personer motta AB-blod, siden alle andre grupper har antistoffer som vil ødelegge disse røde blodcellene.

Mindre antigener

Som med ABO-gruppene finnes en serie proteiner som fungerer som antigener på overflaten av erytrocytene, slik det er tilfelle med ABO-gruppens antigener.

Imidlertid forekommer disse antigenene ikke hos alle individer. Kombinasjonen er heterogen og penetranten (uttrykksnivået av proteinet) er variabelt, derfor er det umulig å klassifisere i grupper som den som eksisterer for ABO og Rh. Derfra kommer navnet sitt fra "mindre antigener", også kjent som "lav forekomst antigener".

Selv om de ikke er hyppige, kan det være naturlige antistoffer mot mindre antigener. Blant dem de vanligste er Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb og Kidd. Alle av dem er ansvarlige for svært alvorlige hemolytiske og posttransfusjonsreaksjoner.

I tillegg kan det forekomme tilfeller av sensibilisering mot mindre antigener ved tidligere kontakt, enten med de antigeniske proteiner på grunn av tidligere transfusjoner eller på grunn av kryssimmunitet.

Kryss immunitet

Det sies at det er kryssimmunitet når to antigener fra to forskjellige kilder (for eksempel en rød blodcelle og en bakterie) er svært like, til det punkt at antistoffene mot et av de antigeniske proteiner også reagerer med det andre fordi de er nesten identiske .

For å forstå det bedre, ta det forrige hypotetiske eksemplet (antigener av en rød blodcelle og bakterier). I intet tilfelle eksisterer naturlige antistoffer, men hvis en person blir utsatt for bakteriene, vil de danne antistoffer mot den.

Slike antistoffer vil reagere senere mot en rød blodcelle hvis antigenene av denne er meget lik de bakterier som induserte dannelsen av antistoffene.

Hvis dette skjer, kan de røde blodcellene med det aktuelle antigeniske proteinet ikke administreres til personen som har antistoffene, da det ville være avvisning. Her ligger betydningen av kryssreaksjoner.

Hva er tverrprøver for?

Siden det er umulig å karakterisere blodet fra forskjellige individer i grupper på grunnlag av de mindre antigenene, er den eneste måten å vite om i en persons blod det er antistoffer mot de mindre antigenene i den andre blodkroppens røde blodlegemer gjennom kryssprøver .

I de tilfeller der antistoffene er tilstede, utløses en hemolyse eller agglutineringsreaksjon, så det konkluderes med at reaksjonen var positiv; det vil si at det er antistoffer mot mindre antigener (selv om det ikke er kjent nøyaktig hva). Ellers er testen negativ.

fundament

Tverrprøverne er basert på antigen-antistoffreaksjonen. Derfor er det med dem mulig å oppdage om det er antistoffer i donorens røde blodlegemer (eller vice versa) i en reseptors serum som fremkaller en antigen-antistoffreaksjon.

Hvis det ikke finnes antistoffer, oppstår ingen reaksjon og testen rapporteres som negativ. Omvendt, hvis reaksjonen er positiv (det er hemolyse eller agglutinering under testen) kan det konkluderes med at antistoffene er tilstede.

I denne forbindelse er det viktig å merke seg at det kan være antistoffer mot røde blodlegemer i både donor- og mottakerserum. Dette er grunnen til at det er to typer kryssreaksjoner.

Typer av kryssreaksjoner

Det er mulig at det finnes antistoffer mot donor erythrocytter i pasientens serum; men motsatt kan også være sant, det vil si antistoffer i donorens serum mot pasientens røde blodlegemer.

Derfor er det to typer kryssprøver:

- Større tverrprøve.

- Mindre kryssprøve.

Begge typer utføres rutinemessig i blodbanen før transfusjon av blodprodukter, gitt at hvis noen av testene er positive, er det stor risiko for transfusjonsreaksjoner som kan bringe pasientens liv i fare.

Større tverrprøve

I denne testen blir det vurdert om det finnes antistoffer mot donorens røde blodlegemer i mottakerens serum.

Hvis dette skjer, kan ikke blodproduktene administreres, da et stort antall anti-legemer som er tilstede i pasientens plasma, vil ødelegge donorens røde blodlegemer raskt, og generere katastrofale reaksjoner i mottakerens kropp i prosessen. Disse reaksjonene er så alvorlige at de kan true livet ditt.

Mindre kryssprøve

I dette tilfellet er det bestemt om det er antistoffer i donorserumet mot mottakerens røde blodceller.

I så fall vil antistoffene begynne å ødelegge erytrocytene av reseptoren. Imidlertid, siden mengden av antistoffer er begrenset, er reaksjonen av mindre intensitet; selv om det fortsatt er farlig.

fasene

Både de store og mindre tverrprøver er delt inn i tre faser:

- Salina.

- Termisk eller inkubasjon.

- Coombs.

I første fase blandes røde blodlegemer og serum i saltoppløsning. Etterpå blir albumin tilsatt, og prøven inkuberes ved 37 ° C i 30 minutter for endelig å fortsette med coombsfasen.

teknikk

Teknikken for kryssprøving er relativt enkel, da det innebærer å tilføye donorrøde blodlegemer til pasientens serum (større kryssprøve) samt mottaker erythrocytter til giverens serum (mindre kryssprøve).

For å indusere antigen-antistoffreaksjonen på relativt kort tid, må en serie standardiserte trinn følges. Disse trinnene er oppsummert på en forenklet måte nedenfor.

Det er viktig å huske på at i den følgende delen er den større kompatibilitetstesten beskrevet, selv om trinnene er de samme for den mindre kompatibilitetstesten, men utveksling av opprinnelsen til røde blodlegemer og serum.