Immersion olje: sammensetning, egenskaper, grunnlag og bruk

Immersion Oil er en viskøs og gjennomsiktig væske som har en høy brytningsindeks. Av denne grunn er det mye brukt i mikroskopiske observasjoner, siden det gir egenskapen til å konsentrere lys når den passerer gjennom 100X objektivet i mikroskopet, og øker dets oppløsningsevne.

Dette skjer på grunn av dannelsen av en viskøs film mellom målet og smeten, slik at lysstrålene ikke sprer seg når de når luften, konsentrerer lysstrålene mot prøven.

Immersion-olje brukes kun med 100X-målet. Det er derfor 100X-målet kalles også et nedsenkningsmål. Resten er kjent som tørre mål. Dette målet kan ikke brukes uten nedsenking av oljen, for uten det ville visualiseringen ikke være tilfredsstillende.

Hovedfunksjonen til nedsenkningsoljen er å gi klarere, skarpere og mer definerte bilder, slik at observasjon av detaljer som ikke ville være mulig med andre mål.

Den første oljen som ble brukt til dette formålet var anisolje, brukt sammen med det første nedsenkingslinsen skapt av Giovanni Battista Amici. Dette unngikk bare kromatisk avvik, men det økte ikke den numeriske blenderåpningen til linsesystemet.

Deretter ble cedaroljen brukt, men den presenterte mange ulemper som tvang sin misbruk. Blant dem var den høye surhetsgraden, som skadet målene på kort sikt.

Deretter ble andre stoffer som vann og glyserin brukt til syntetiske nedsenkningsoljer ble opprettet, som gradvis ble raffinert inntil nåværende nedsenkningsolje, som er en kompleks forbindelse av organiske stoffer.

Sammensetning av nedsenkningsolje

Neddykkingsoljen utgjøres av en blanding av organiske forbindelser, så som: terfenyl, hydrogenert terfenyl, naturlige hydrokarboner og polybutener.

Immersion olje egenskaper

Neddykkingsoljen er en lysegul væske, litt viskøs utseende, med en karakteristisk lukt og tetthet mellom 0, 92 og 0, 99 g / cm3.

Neddykkingsoljen er ikke løselig i vann og har et kokepunkt på 340 ° C. Brekningsindeksen a (n 20 ° C / D): varierer fra 1, 482-1, 516. I så mye er indeksen for betennelse 110 ° C og viskositeten svinger mellom 100 og 120 mPa.s.

Dette produktet må kasseres på riktig måte, da det er økotoksisk. Det vil si at det er skadelig for miljøet, som hovedsakelig påvirker akvatiske dyr. På den annen side er det irriterende for huden og slimhinnene. Ved inntak er det nefrotoksisk og kardiotoksisk.

Neddykkingsoljen er stabil ved 15 til 25 ° C, temperatur ved hvilken den må lagres.

Grunnleggende om nedsenking av olje

Når du bruker høyere forstørrelseslinser, bør lysets intensitet økes. Imidlertid er mange av lysstrålene tapt fordi de er spredt når de kommer til luften (mellom rommet og linsen), og til og med noen stråler har en total refleksjon.

Neddykkingsoljen har en brytningsindeks som ligner glassets. Derfor, når oljen er kontaktet mellom 100X-objektivet og dekslet, er lysstrålene konsentrert.

De konsentrerte strålene krysser prøven og øker skarpheten i bildet, det vil si øke målets numeriske blenderåpning og korrigere kromatiske og sfæriske avvik.

Bruk eller applikasjoner

Bruken av nedsenkningsolje er spesielt nødvendig når det er nødvendig å observere et bilde på en bredere måte, med sikte på større forstørrelse (mål på 100X) og dermed kunne se detaljer som er essensielle for å etablere en diagnose.

Derfor er det mye brukt i mikroskopiske studier av ulike områder som: histologi, cytologi, hematologi og bakteriologi. For eksempel er det nyttig for å studere egenskapene til pasientens celler og vev.

Det tjener også til analyse av blodpropper, der vi ønsker å detaljere egenskapene til hemoparasitter i og utenfor erytrocytene, samt i Gram-preparatene, for å definere mikroorganismers morpotintoriale egenskaper.

Det brukes vanligvis i faste preparater, som det ikke anbefales i friske preparater. Dette skyldes at overflatespenningen av oljen fører til at dekselet beveger seg, noe som fører til at prøven beveger seg under observasjonen og forhindrer analysen.

På den annen side er nedsenkningsolje ikke bare nyttig i konvensjonell optisk mikroskopi: den brukes også i totale interne reflekterende fluorescensmikroskoper (TIRFM) og i konfokale fluorescensapplikasjoner.

Fremgangsmåte for å observere et preparat ved bruk av nedsenkningsolje

For å se et mikroskoppreparat, først fokus på preparatet med sikte på lavere forstørrelse, vanligvis 10X, med lav lysintensitet.

Da er målet om 40X passert, og lysets passasje økes noe. Enkelte analyser kan gjøres med denne økningen, men for å se strukturelle detaljer trenger du 100X forstørrelsen.

Før du går til 100X-målet, plasseres en dråpe nedsenketolje på dekslet, akkurat der du vil observere det, og så beveger revolveren av mikroskopet seg for å finne 100x-målet i preparatet.

Lysstyrken er regulert (øker) (flytter kondensatoren og åpner membranen). Deretter bør noen små bevegelser som gis til mikrometerskruen (fremover eller bakover) fokusere perfekt hvis mikroskopet bruker parafokale mål.

Hvis du prøver å fokusere preparatet direkte med nedsenkningsmålet, kan det være problemer med å finne fokus. Det er ikke en umulig handling, men vanskeligheten øker betydelig.

omsorg

For å bruke nedsenkningsoljen må visse forhold tas i betraktning.

Når et farget preparat er gjort, for eksempel et smear farget med Giemsa eller et Gram, er det nødvendig å vente på at smøret tørker helt før du setter ned oljen. Ellers vil oljen sammen med vannet danne miceller som ikke tillater at preparatet visualiseres.

På den annen side, etter å ha observert mengden preparater, det vil si på slutten av arbeidsdagen, skal 100X-objektet rengjøres forsiktig, ved hjelp av et papir for etanollinser. Hvis objektivet er skittent, tørker oljen på det, og det vil da være svært vanskelig å fjerne det, og ødelegge visningsfeltet.

På samme måte må det tas hensyn til at oljen er brennbar og må holdes vekk fra varmekilder (lightere). Det er viktig å unngå oppvarming over 65 ° C.

Endelig er oljen et giftig produkt. Derfor bør direkte kontakt med hud og slimhinner unngås, der det kan gi mild irritasjon. For å unngå ulykker anbefales bruk av hansker og vernebriller for å manipulere det.

Ved kontakt med oljen skal området vaskes med rikelig med vann. Hvis oljen spruter i øynene, skal den vaskes på samme måte, og hold øynene åpne. Ved utilsiktet inntak er det viktig å drikke varmt vann og fremkalle oppkast, i tillegg til å gå til nærmeste lege.